@PHDTHESIS{ 2017:719969848,
 	title = {Caracterização de uma proteína rica em glicinas e da paramiosina do carrapato Rhipicephalus microplus},
 	year = {2017},
 	url = "http://tede2.pucrs.br/tede2/handle/tede/7707",
 	abstract = "O Rhipicephalus microplus é um carrapato que infesta preferencialmente bovinos, causando
 um grande prejuízo à pecuária. O principal método de controle é o uso de acaricidas, os quais
 selecionam populações resistentes, além de aumentar o custo e o risco de contaminação da
 carne, do leite e do ambiente. Desta forma, antígenos vacinais têm sido identificados e
 caracterizados como alternativa aos acaricidas. Moléculas salivares de parasitos hematófagos
 podem inibir respostas associadas à homeostase e modular o sistema imune do hospedeiro e,
 portanto, são opções na busca por vacinas anti-carrapato. Neste contexto, este trabalho
 caracterizou uma proteína rica em glicinas e a paramiosina do R. microplus. Proteínas ricas
 em glicinas são secretadas na saliva e são essenciais na fixação e na alimentação do parasito.
 Já a paramiosina é capaz de evadir o sistema imune do hospedeiro e mostrou-se um
 importante alergeno em ácaros e antígeno vacinal contra helmintos. As sequências de cDNA e
 aminoácidos da proteína rica em glicinas de R. microplus (RmPRG) foram identificadas e
 analisadas, revelando duas porções distintas da proteína (com glicinas isoladas ao longo da
 região N-terminal e padrões repetidos contendo glicinas ao longo da região C-terminal). A
 clonagem, expressão e purificação da RmGRP foram realizadas e a proteína recombinante foi
 testada quanto ao reconhecimento por soros de bovinos naturalmente e experimentalmente
 infestados, indicando a sua antigenicidade, mas também uma alta heterogeneidade no
 reconhecimento da proteína entre indivíduos e entre infestações no mesmo indivíduo. Além
 disso, a RmGRP recombinante foi reconhecida pelos soros de coelhos imunizados com saliva
 e glândula salivar de fêmeas parcialmente e totalmente ingurgitadas e ovos, mas não por soros
 de coelhos imunizados com intestino. A expressão do gene codificante para a RmGRP
 (rmgrp) em diferentes tecidos de fêmeas e fases do desenvolvimento do carrapato foi avaliada
 por qRT-PCR. A transcrição do gene foi encontrada em ovos, larvas, machos adultos, além de
 glândulas salivares, corpos gordurosos e ovários de fêmeas parcialmente e totalmente
 ingurgitadas, apresentando os maiores níveis de expressão nas larvas de 1 dia e nas glândulas
 salivares de fêmeas totalmente ingurgitadas. rmgrp não foi expresso nos ovos de 3 e 6 dias e
 no intestino de fêmeas parcialmente e totalmente ingurgitadas, corroborando o resultado
 anterior. Ainda foram avaliados os efeitos do silenciamento do RNAm correspondente à
 RmGRP e à RmPRM, o que resultou na redução da taxa de postura de ovos no grupo em que
 o gene da RmPRM foi silenciado e da eclosão de larvas em fêmeas tratadas nos dois grupos.
 Portanto, sugere-se que as duas proteínas são importantes durante o desenvolvimento larval,
 mas só a RmPRM seja necessária na formação e/ou postura dos ovos. Também foi realizada a
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 clonagem da região codificante e expressão dos fragmentos N-terminal, interno e C-terminal
 da paramiosina de R. microplus (RmPRM) em E. coli e da RmPRM completa em P. pastoris,
 sendo confirmadas por SDS-PAGE e western-blot. A partir dos dados obtidos, ambas
 RmGRP e RmPRM apresentam características que fazem delas possíveis candidatas a
 comporem uma vacina coquetel contra o R. microplus.",
 	publisher = {Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul},
 	scholl = {Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular},
 	note = {Faculdade de Biociências}
}