@MASTERSTHESIS{ 2022:1319111888, title = {Abordagem terapêutica com um lisado bacteriano (om-85) frente a infecção pelo virus sars-cov-2 : um estudo experimental ex vivo}, year = {2022}, url = "https://tede2.pucrs.br/tede2/handle/tede/10412", abstract = "Introdução: A pandemia de COVID-19, causada pelo vírus SARS-CoV-2, acomete muitas pessoas ao redor do mundo. Mesmo com o desenvolvimento de vacinas, há necessidade urgente em se desenvolver abordagens terapêuticas eficazes no combate e prevenção dessa infecção viral. O OM-85 é um lisado bacteriano, imunoestimulador, capaz de modular a resposta antiviral, já utilizado para prevenção de infecções respiratórias recorrentes (otite média aguda, pneumonia, rinite, faringoamigdalite, asma, doença pulmonar obstrutiva crônica). Objetivo: Entender se o lisado bacteriano (OM-85) é capaz de ativar mecanismos moleculares antivirais em células infectadas por SARS-CoV-2. Métodos: Trata-se de um estudo experimental ex vivo. As células epiteliais provenientes do lavado nasal de pacientes com COVID-19, diagnosticados por RT-PCR, com até 48h de internação hospitalar e em até três semanas do início de sintomas, foram cultivadas por 24 horas na presença de OM-85 (10 μg/ml) e 2,5 ng/ml de IFNβ. O RNA das células foi extraído e foi realizada por RT-PCR, a análise da expressão relativa do gene SARS-CoV-2 N1, do gene do receptor do vírus ACE2 e dos genes relacionados com a resposta antiviral, ISG15, MAVS, MDA5, OASL, IRF3, RIG-I, IFNλ e com resposta inflamatória, IL-6, IL-8, mTOR, TRL2, TLSP, IL1B. O sobrenadante das células foi coletado para análise das citocinas por ELISA. Além disso, linhagens celulares A549WT e Calu-3 foram cultivadas, infectadas com SARS-CoV-2 por uma hora e tratadas com OM-85 por 24 horas. Resultados: Tratamento com OM-85 reduziu a expressão gênica viral do SARS-Cov-2 e aumentou a expressão da molécula RIG-I. Análises na expressão de IFNB, ISG15, IL-6, MDA5, OASL, IL1B não tiveram significância estatística na sua expressão quando comparados o grupo de células não tratadas com o grupo tratado. Já a expressão gênica de IL-8, MAVS, IRF3, mTOR, IFNλ, TRL2, TLSP e ACE2 não foi detectada. Ao analisarmos as proteínas IFNB, IL-6, IL-8, IL-10 e TNFα por teste de ELISA, não houve diferença relevante entre o grupo controle e grupo tratado. Isso se repetiu ao analisarmos as correlações dessas mesmas proteínas, bem como com as demais citocinas com a expressão de SARS-CoV-2. Quanto ao experimento in vitro a análise da expressão gênica do vírus demonstrou uma tendência na redução dessa expressão em células A549WT quando tratadas com OM-85; o que não foi observado na linhagem Calu-3. Conclusão: Nossos dados complementam estudos prévios que mostram efeito protetor do OM-85 frente à infecção por SARS-CoV-2 em camundongos. Ensaios clínicos são necessários para confirmar uma possível utilização terapêutica ou profilática frente a infecção por coronavírus.", publisher = {Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul}, scholl = {Programa de Pós-Graduação em Medicina/Pediatria e Saúde da Criança}, note = {Escola de Medicina} }