@PHDTHESIS{ 2022:6786286, title = {Caracterização de rizobactérias Streptomyces spp. como halotolerantes e sua ação na mitigação do estresse salino em plantas de milho (Zea mays L.)}, year = {2022}, url = "https://tede2.pucrs.br/tede2/handle/tede/10390", abstract = "A salinização do solo, causada por fatores naturais ou antropogênicos, tem sido reconhecida como um grave problema ambiental, resultando em extensa área de degradação e restringindo a produtividade agrícola em todo o mundo. O excesso de sais no solo afeta as plantas por causar (i) estresse osmótico, restringindo a absorção de água pelas raízes, (ii) estresse iônico, gerando danos nutricionais e metabólicos à planta, e (iii) estresse oxidativo, que compromete principalmente a eficiência fotossintética. Espécies com importância agrícola, como o milho, têm seu desenvolvimento comprometido pela salinização do solo. Por isso, pesquisas a respeito de métodos que permitam diminuir o impacto do estresse salino, mantendo os níveis de produtividade das culturas, têm se tornado cada vez mais importantes. O uso de rizobactérias promotoras do crescimento vegetal (PGPR) é uma alternativa sustentável a ser utilizada na agricultura. Elas atuam como bioestimulantes, produzindo fitormônios, sideróforos, ACC desaminase e compostos orgânicos voláteis (VOCs), e podem induzir tolerância sistêmica nas plantas, a partir da síntese de osmólitos e enzimas antioxidantes. Podem ainda mitigar os efeitos adversos causados pelo estresse salino por meio da síntese de exopolissacarídeos e biofilme. Além disso, algumas destas bactérias são halotolerantes, podendo ser empregadas em solos salinos para auxiliar as plantas a reduzir os efeitos adversos causados pela salinidade. O objetivo deste trabalho foi caracterizar isolados de Streptomyces spp. (Stm; CLV95, CLV97, CLV178 e CLV179) como bactérias halotolerantes e indutoras da tolerância ao estresse salino em plantas de milho (Zea mays L.). Em uma abordagem tecnológica, o efeito dos metabólitos indólicos e fenazinas semipurificados obtidos a partir dos isolados de Stm CLV91 e CLV95, foram avaliados como agentes antimicrobianos e promotores do crescimento de plantas de milho. O crescimento dos isolados Stm foi avaliado por unidades formadoras de colônias e viabilidade celular. A caracterização dos isolados de Streptomyces spp. como PGPR halotolerantes ocorreu por meio da análise da produção de compostos indólicos, sideróforos, VOCs e da capacidade de solubilização de P pelos isolados, em diferentes concentrações de NaCl. A produção de substâncias poliméricas extracelulares (EPS) e de biofilme foram analisadas sob condições normais e salinas. Para avaliar os mecanismos de tolerância à salinidade, sementes de milho foram microbiolizadas com isolados de Stm, cultivadas em casa de vegetação durante 45 dias e as plantas (estágio V5) foram tratadas com 100 e 300 mM de NaCl. A tolerância das plantas à salinidade foi avaliada pela determinação do conteúdo de prolina e aminoácidos solúveis, e pela atividade de enzimas antioxidantes nas células vegetais. Os metabólitos indólicos e fenazinas, semipurificados de culturas de Stm, foram aspergidos nas folhas de milho (estágio V3) e o crescimento vegetativo foi avaliado. Os resultados demonstraram que todos os isolados foram capazes de crescer em soluções salinas e mantiveram a produção de seus metabólitos, sendo considerados halotolerantes. CLV179 foi a maior produtora de biofilme e EPS em condições salinas. O ensaio de tetrazólio provou ser eficiente para determinar a viabilidade celular, associado à quantificação da biomassa bacteriana, e demonstrou como o estresse salino pode afetar o desenvolvimento dos isolados. A inoculação da maioria dos isolados de Stm nas plantas de milho promoveu aumento da síntese de prolina e aminoácidos solúveis, e da atividade das enzimas antioxidantes CAT, POX e APX, com diferenças entre os isolados, caracterizando a ativação de indução de tolerância sistêmica, uma vez que o estresse oxidativo foi reduzido nas raízes e nas folhas das plantas. O protocolo proposto para o fracionamento e semipurificação do sobrenadante das culturas de Stm (CLV91 e CLV95) foi eficiente na extração dos metabólitos indólicos e fenazinas, e estes, quando aspergidos nas folhas de plantas de milho resultaram em alterações no crescimento vegetativo. A fração contendo os metabólitos do isolado CLV91 apresentou fenazinas na sua composição e ação antimicrobiana contra o fungo fitopatogênico Alternaria solani.", publisher = {Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul}, scholl = {Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular}, note = {Escola de Ciências Saúde e da Vida} }