@MASTERSTHESIS{ 2018:1790285251,
 	title = {Participação do vírus sincicial respiratório, das espécies reativas de oxigênio e da autofagia na formação de redes extracelulares de eosinófilos na asma},
 	year = {2018},
 	url = "http://tede2.pucrs.br/tede2/handle/tede/8342",
 	abstract = "INTRODUÇÃO: a asma é uma doença inflamatória crônica caracterizada pela secreção de elevados níveis de citocinas do perfil T helper 2 (Th2) como interleucina (IL)-4, IL-5 e IL-13, espécies reativas de oxigênio (EROs), aumento da autofagia e formação redes extracelulares de eosinófilos (EETs). A infecção pelo vírus sincicial respiratório (VSR) pode facilitar o desenvolvimento da sensibilização alérgica bem como exacerbar os sintomas da doença. Recentemente, estudos têm demonstrado o aumento da autofagia em eosinófilos das vias de pacientes asmáticos, contribuindo para o aumento da resposta inflamatória nas vias aéreas. Na asma, a produção excessiva de EETs pode causar dano tecidual e aumento da viscosidade do muco, podendo contribuir para o aumento da obstrução da via aérea e redução da função pulmonar. Entretanto, os mecanismos de formação das EETs e seu papel fisiopatológico na asma são pouco compreendidos.
 OBJETIVO: esta dissertação teve como objetivo elucidar alguns mecanismos envolvidos na liberação de EETs na asma. Avaliamos a participação do VSR in vitro, das EROs e da autofagia nos mecanismos envolvidos na liberação das EETs em eosinófilos do lavado broncoalveolar (LBA) em um modelo experimental de asma.  
 METODOLOGIA: para o desenvolvimento do modelo experimental de asma, camundongos BALB/cJ foram sensibilizados com duas injeções subcutâneas de ovalbumina (OVA) nos dias 0 e 7 seguidos por três desafios intranasais com OVA nos dias 14, 15 e 16 do protocolo. No artigo científico 1, eosinófilos do LBA de animais do grupo OVA e do grupo controle foram estimulados com VSR (103 PFU/mL) in vitro por 3 horas. Após este período, o sobrenadante da cultura foi coletado para a realização das técnicas avaliadas conforme os objetivos específicos deste artigo científico. No artigo cientifico 2, durante o protocolo experimental de asma, os animais foram tratados via intranasal com um inibidor da nicotinamida adenina dinucleotídeo fosfato oxidase (NADPH oxidase), difenileno-iodônio (DPI), ou com um precursor da glutationa, N-acetilcisteína (NAC), 45 minutos antes dos três desafios intranasais com OVA. Já no artigo cientifico 3, os animais foram tratados via intranasal com um inibidor de autofagia, 3-metiladenina (3-MA), 45 minutos antes dos três desafios intranasais com OVA. Ao final do protocolo o LBA e o tecido pulmonar foram coletados para a realização das técnicas avaliadas em cada um dos artigos científicos, conforme seus objetivos específicos. 
 RESULTADOS: no artigo cientifico 1, observamos um aumento na liberação de EETs em eosinófilos do LBA de animais submetidos ao modelo experimental de asma e estimulados com VSR in vitro. Por outro lado, o VSR in vitro foi capaz de diminuir os níveis de IFN-γ no sobrenadante da cultura de eosinófilos do LBA. Em relação aos resultados do artigo científico 2, verificamos que no grupo OVA tratado com NAC ocorreu uma diminuição no número de células inflamatórias no LBA bem como uma redução no infiltrado inflamatório pulmonar. Além disso, os animais do grupo OVAM tratados com DPI ou NAC apresentaram uma redução da enzima EPO, hiperplasia de células caliciformes, citocinas inflamatórias e da proteína fator nuclear kappa B (NFĸB p65). Os tratamentos com DPI ou NAC foram capazes de reduzir a formação de EROs, aumentar a atividade da enzima catalase antixidante (CAT). Por outro lado, parâmetros do metabolismo energético mitocondrial aumentaram somente com o tratamento com NAC. Por fim, demonstramos que os tratamentos com DPI ou NAC foram capazes de reduzir a formação de EETs do LBA. No artigo científico 3, observamos que no grupo OVA tratado com o inibidor de autofagia, 3-MA, ocorreu uma diminuição no número de células inflamatórias no LBA bem como uma redução do infiltrado inflamatório pulmonar. Além disso, os animais tratados com 3-MA apresentaram uma redução nos níveis da enzima EPO, hiperplasia de células caliciformes, citocinas inflamatórias e da proteína NFĸB p65. O tratamento com 3-MA foi capaz de reduzir a formação de EROs bem como aumentar os níveis da enzima antioxidante CAT. O tratamento com 3-MA também melhorou parâmetros do metabolismo energético mitocondrial e a atividade da enzima Na+,K+ATPase. Demonstramos também que o tratamento com 3-MA diminuiu o imunoconteúdo da proteína light chain 3B (LC3B) em eosinófilos do LBA e no tecido pulmonar e reduziu a formação de EETs no LBA. 
 CONCLUSÃO: Nossos resultados demonstram um importante papel do VSR na indução da liberação de EETs. Além disso, verificamos que os tratamentos com DPI, NAC e 3-MA foram capazes de reduzir a inflamação das vias aéreas, o estresse oxidativo e a liberação de EETs no LBA. Demonstramos que o VSR, as EROs e a autofagia participam dos mecanismos que regulam o processo de liberação das EETs na asma. Assim, a identificação de alguns desses mecanismos envolvidos na liberação de EETs na asma pode contribuir para uma melhor compreensão da patogênese desta doença inflamatória crônica que prejudica a qualidade de vida dos pacientes e é responsável por um alto custo econômico para o Sistema Único de Saúde (SUS).",
 	publisher = {Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul},
 	scholl = {Programa de Pós-Graduação em Medicina/Pediatria e Saúde da Criança},
 	note = {Escola de Medicina}
}