@PHDTHESIS{ 2018:1043838632,
 	title = {Células-tronco pluripotentes induzidas (iPSCs) de indivíduos com displasia cortical focal do tipo Taylor : buscando a compreensão da patogênese durante o processo de neurodiferenciação},
 	year = {2018},
 	url = "http://tede2.pucrs.br/tede2/handle/tede/7909",
 	abstract = "As Malformações do Desenvolvimento Cortical (MDC) reúnem uma ampla gama de patologias do Sistema Nervoso Central (SNC) relacionadas a um complexo processo de formação do córtex. A Displasia Cortical Focal (DCF), tipo comum de MDC, é relatada como a lesão cerebral estrutural mais frequente encontrada em crianças com epilepsia refratária ao tratamento medicamentoso submetidas à cirurgia. O tratamento cirúrgico, com a ressecção completa da lesão displásica, é capaz de cessar a convulsão resistente a drogas antiepiléticas, melhorando a qualidade de vida do indivíduo e diminuindo a morbidade. A DCF é caracterizada por múltiplos tipos de alterações tanto na arquitetura cortical quanto em anormalidades citológicas e sua patogênese ainda é desconhecida. Em 2004, Palmini e colaboradores classificaram as DCF de acordo com observações na substância branca e na arquitetura da camada cortical. A DCF do tipo Taylor é caracterizada por uma desorganização laminar e neurônios displásicos, comprometendo a organização do córtex em seis camadas histológicas tradicionalmente conhecidas. A compreensão dos mecanismos de ação das doenças neurológicas tem envolvido o uso de modelos animais. Porém, no caso do desenvolvimento cerebral das síndromes epilépticas muitas décadas de estudo não conseguiram fornecer uma visão conclusiva sobre seus mecanismos. Modelar doenças neurológicas é especialmente atraente para aplicação das células pluripotentes induzidas (iPSCs), possibilitando derivar neurônios específicos do próprio paciente para estudos in vitro, contribuindo para a investigação da doença. O objetivo do presente estudo foi investigar as possíveis diferenças na neurogênese e neurodiferenciação de iPSCs a partir de fibroblastos de indivíduos acometidos pela DCF do tipo Taylor e indivíduos normais. As iPSCs foram geradas a partir de fibroblastos de pele de dois indivíduos displásicos e dois indivíduos saudáveis, para compor o grupo controle. A reprogramação se deu através da exposição dos fibroblastos a vetores virais contendo os genes OCT4, KLF4, SOX2, e c-MYC e os clones gerados foram caracterizados por imunohistoquímica. As células iPSCs foram neurodiferenciadas e analisadas nos períodos de 14, 22 e 35 dias. Também foram analisados o tecido cerebral, fibroblastos e células iPSCs dos indivíduos. Através de qRT-PCR, a expressão de 14 genes envolvidos no processo de neurodiferenciação foram quantificados. Estes genes estão associados a migração e diferenciação neural,
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 aspectos sinápticos e sinalização Notch. Ambos os indivíduos foram diagnosticados com DCF do tipo Taylor, mais especificadamente, do tipo IIb. No geral, os indivíduos displásicos apresentaram alterações na quantificação relativa na maioria dos genes analisados comparados aos indivíduos controle, em todos os processos e grupos de estudo (fibroblastos, tecido cerebral, iPSCs e células neurodiferenciadas). Os genes envolvidos nos processos de migração e diferenciação neural, aspectos sinápticos e sinalização Notch apresentaram expressões bastante alteradas nos indivíduos displásicos, com o início da maioria dos processos precoces, antes do período fisiologicamente típico. A partir dos resultados encontrados, podemos inferir que durante o período embrionário, no processo de neurogênese e neurodiferenciação, indivíduos acometidos pela doença, possivelmente possuem neuroblastos mais sensíveis a estímulos, apresentando diferenças no desenvolvimento do Sistema Nervoso. Essas alterações podem estar diretamente relacionadas com a formação do cérebro displásico. Este trabalho amplia a compreensão do neurodesenvolvimento embrionário, abrindo portas para futuras investigações de forma mais aprofundada sobre o envolvimento e influência de cada um dos genes analisados na patogênese da DCF, bem como em cada mecanismo de ação envolvido na formação do cérebro.",
 	publisher = {Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul},
 	scholl = {Programa de Pós-Graduação em Medicina e Ciências da Saúde},
 	note = {Escola de Medicina}
}