@PHDTHESIS{ 2016:19572145,
 	title = {Efeitos do crowding macromolecular na atividade enzim?tica da 2-trans-ENOIL-ACP (COA) redutaze de Mycobacterium tuberculosis},
 	year = {2016},
 	url = "http://tede2.pucrs.br/tede2/handle/tede/7307",
 	abstract = "O meio intracelular ? uma solu??o aquosa complexa, pois ? preenchida por diversos tipos de macromol?culas. Espera-se que essa grande concentra??o de macromol?culas resulte em um comportamento n?o ideal para a solu??o. Para mimetizar o ambiente intracelular, os efeitos do da ocupa??o macromolecular s?o comumente estudados in vitro utilizando agentes de crowding. O objetivo central do presente estudo ? avaliar os poss?veis efeitos de agentes de crowding macromolecular sint?ticos nos par?metros cin?ticos aparentes de estado-estacion?rio (Km, kcat e kcat/Km) para a rea??o qu?mica catalisada pela 2-trans-enoil-ACP(CoA) redutase de Mycobacterium tuberculosis (InhA). Os resultados mostraram que ficoll 70, ficoll 400 e dextran 70 t?m efeitos negligenci?veis na atividade da InhA na faixa de concentra??o utilizada. Por outro lado, um complexo efeito foi observado na presen?a do PEG 6000. A sacarose, que foi utilizada como controle nos experimentos, reduziu os valores de kcat/Km para o NADH e kcat para o 2-trans-dodecenoil-CoA de uma maneira concentra??o-dependente. Os resultados de din?mica molecular sugerem que a InhA adota uma forma mais compacta na presen?a de sacarose, o que provavelmente tem efeitos nos resultados de cin?tica de estado-estacion?rio. A presen?a dos agentes de crowding parece alterar a abund?ncia relativa dos diferentes conf?rmeros da InhA em solu??o. Os efeitos do crowding macromolecular na energia (Ea e E?), entalpia (?H#), entropia (?S#) e energia livre de Gibbs de ativa??o (?G#) foram determinados. Os valores de ?G# para todos os agentes de crowding testados foram similares ao tamp?o Pipes 100 mM, sugerindo que os efeitos do volume exclu?do n?o facilitam a forma??o do complexo ativado est?vel ES#. A n?o linearidade do gr?fico de Arrhenius para o PEG 6000 sugere que intera??es ?brandas? possam atuar nos efeitos do crowding macromolecular.",
 	publisher = {Pontif?cia Universidade Cat?lica do Rio Grande do Sul},
 	scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Medicina e Ci?ncias da Sa?de},
 	note = {Escola de Medicina}
}