@MASTERSTHESIS{ 2016:604073209,
 	title = {Purifica??o da enzima glucocerebrosidase humana produzida no leite do primeiro clone caprino transg?nico da Am?rica Latina},
 	year = {2016},
 	url = "http://tede2.pucrs.br/tede2/handle/tede/7008",
 	abstract = "A doen?a de Gaucher, descrita pela primeira vez em 1882, ? uma rara desordem gen?tica autoss?mica recessiva caracterizada pela defici?ncia da atividade da glucocerebrosidase, uma enzima lisossomal que catalisa a hidr?lise de glucocerebros?deo em glicose e ceramida. A presen?a de dois alelos mutantes localizado na regi?o q21 do cromossomo 1 confirma o diagn?stico, sendo as muta??es mais comuns s?o N370S e L444P. O ac?mulo desta enzima pode ser tratada com terapia de reposi??o enzim?tica, usando glucocerebrosidase recombinante, bastante eficaz no tratamento da doen?a, revertendo toda a cascata de eventos bioqu?micos que acabam por ocasionar as manifesta??es cl?nicas apresentadas pelos pacientes ou melhorando muitos dos seus sinais e sintomas. As caracter?sticas cl?nicas comumente associados com a doen?a de Gaucher incluem hepatoesplenomegalia, anemia, trombocitopenia e envolvimento ?sseo, hematol?gico e comprometimento neurol?gico no tipo II e III. H? tr?s enzimas recombinantes para a terapia de reposi??o enzim?tica na doen?a de Gaucher: Velaglucerase alfa, Alfataliglucerase e Imiglucerase que diferem entre si principalmente em rela??o ? forma de produ??o, ? sequ?ncia de amino?cidos e ao padr?o de glicosila??o. Atualmente, a terapia de reposi??o enzim?tica ? administrada por um medicamento chamado Cerezyme? (imiglucerase), produzido atrav?s da tecnologia do DNA recombinante utilizando culturas de c?lulas obtidas do ov?rio de hamster chin?s. A imiglucerase difere da glucocerebrosidase natural, de origem placent?ria, por um amino?cido na posi??o 495, onde a histidina ? substitu?da por arginina. Entretanto, o custo do medicamento dispon?vel ? muito alto, dificultando o acesso ? terapia. No Brasil, h? aproximadamente 600 portadores da doen?a e o tratamento ? garantido por lei a todos os pacientes, embora os gastos com a compra do medicamento sejam muito elevados. Este custo poderia ser consideravelmente reduzido se a enzima pudesse ser produzida de forma alternativa. Estudos demonstraram que t?cnicas reprodutivas avan?adas permitem que animais transg?nicos possam ser usados como biorreatores para a produ??o de prote?nas recombinantes de elevado potencial biol?gico e interesse farmac?utico. O Laborat?rio de Biologia Molecular e do Desenvolvimento da Universidade de Fortaleza em parceria com a Quatro G Pesquisa e Desenvolvimento desenvolveu o primeiro clone transg?nico de cabras da Am?rica Latina cuja gl?ndula mam?ria ? usada como um biorreator para a produ??o da prote?na glucocerebrosidase humana recombinante. Neste presente estudo, foi apresentado uma alternativa de purifica??o da enzima glucocerebrosidase a partir do leite obtido atrav?s da lacta??o induzida da cabra transg?nica e clonada. De acordo com os resultados, pode-se criar uma expectativa positiva para a obten??o da glucocerebrosidase atrav?s do procedimento citado ao longo deste estudo. A confirma??o da presen?a de atividade enzim?tica de glucocerebrosidase foi realizada pelo ensaio fluorim?trico, Cerezyme? e leite da cabra controle (n?o transg?nica) foram usados com controle positivo e negativo, respectivamente. O objetivo deste estudo foi estabelecer protocolos de purifica??o da enzima glucocerebrosidase a partir do leite da cabra clonada e transg?nica e confirmar a atividade enzim?tica, avaliar a express?o da enzima por eletroforese e caracterizar a prote?na recombinante atrav?s da espectrometria de massa.",
 	publisher = {Pontif?cia Universidade Cat?lica do Rio Grande do Sul},
 	scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Biotecnologia Farmac?utica},
 	note = {Faculdade de Farm?cia}
}