@PHDTHESIS{ 2016:1145101281, title = {Efeito da suplementa??o de leucina sobre a prolifera??o de pr?-osteoblastos da linhagem MC3T3-E1}, year = {2016}, url = "http://tede2.pucrs.br/tede2/handle/tede/6852", abstract = "Introdu??o: a leucina (Leu) ? um amino?cido (AA) essencial, de cadeia ramificada, presente na alimenta??o humana, principalmente no leite e seus derivados, que tem sido investigado por exercer um importante papel na sinaliza??o celular. Contudo, a maioria dos estudos que avalia as respostas celulares mediadas pela Leu, trabalha dentro de uma perspectiva de normalidade na oferta do AA e pouco se sabe sobre os efeitos que a suplementa??o pode gerar sobre os mecanismos de prolifera??o celular. Os efeitos do excesso deste amino?cido, t?m sido extensivamente estudado em diversos tipos de c?lulas, entretanto existe uma limita??o importante na quantidade de informa??es dispon?veis na literatura cient?fica em rela??o as suas a??es em c?lulas do tecido ?sseo. Objetivo: este estudo teve como objetivo analisar os efeitos da suplementa??o de leucina sobre a prolifera??o de pr?-osteoblastos da linhagem MC3T3-E1. M?todos: a cultura dos pr?-osteoblastos da linhagem MC3T3-E1, foi realizada com ?-MEM, suplementado com 10% de soro fetal bovino e 1% de antibi?tico. Ap?s determina??o de concentra??es, o tratamento foi feito com a adi??o de Leu, dilu?da ao meio de cultura nas concentra??es de 50 ?M, o que corresponde a um acr?scimo percentual de 12.5% a mais do amino?cido ao meio de cultura, por 48 horas. A viabilidade e a prolifera??o celular foram avaliadas pela t?cnica do Trypan Blue. Para a identifica??o dos mecanismos relacionados a inibi??o da prolifera??o celular, foram realizados ensaios que avaliaram a citotoxicidade (LDH); apoptose (Anexina V); estresse oxidativo (TBARS e DCFH); perfil inflamat?rio (TGF-? 1 e CBA); autofagia (laranja de acridina e citometria de fluxo); senesc?ncia (DAPI) e dano ao DNA (teste cometa). Resultados e conclus?es: a suplementa??o de Leu (50 ?M) inibe a prolifera??o celular em 40%, com causas n?o relacionadas a necrose celular, apoptose, estresse oxidativo, inflama??o ou autofagia. A suplementa??o de Leu provocou dano ao DNA, com consequente senesc?ncia e diminui??o da prolifera??o celular de pr?-osteoblastos da linhagem MC3T3-E1.", publisher = {Pontif?cia Universidade Cat?lica do Rio Grande do Sul}, scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Medicina e Ci?ncias da Sa?de}, note = {Faculdade de Medicina} }