@MASTERSTHESIS{ 2014:484482377, title = {An?lise da express?o dos receptores purin?rgicos P2X no c?ncer de bexiga}, year = {2014}, url = "http://tede2.pucrs.br/tede2/handle/tede/1776", abstract = "O sistema purin?rgico pode induzir a prolifera??o, diferencia??o e morte em c?lulas tumorais. Diferentes receptores purin?rgicos P2, est?o envolvidos na inibi??o do crescimento tumoral. Embora os mecanismos n?o sejam completamente conhecidos, estes receptores podem representar alvos terap?uticos interessantes no tumor de bexiga. As linhagens celulares derivadas de tumor de bexiga humano RT4 e T24 t?m sido usadas como modelo de baixa e alta malignidade de tumor, respectivamente. Estudos realizados pelo nosso grupo de pesquisa t?m demonstrado o envolvimento do sistema purin?rgico no tumor de bexiga. A quercetina aumenta a hidr?lise do ADP e inibe a ecto - 5' - nucleotidase / CD73, exercendo um efeito anti - proliferativo sobre as c?lulas T24. Tamb?m demonstramos que as linhagens de c?lulas T24 expressam enzimas CD39L4 e ecto - 5' - nucleotidase / CD73, e t?m baixa atividade hidrol?tica de ATPase e ADP?sica com uma elevada atividade AMP?sica. Estes dados sugerem o envolvimento das enzimas e receptores purin?rgicos na progress?o do tumor de bexiga, bem como em outros tipos de tumor. O objetivo do estudo ? caracterizar a express?o dos receptores purin?rgicos P2X (1-7) em bi?psias de c?ncer de bexiga e linhagens celulares de tumor de bexiga humano, relacionado com o perfil de genes inflamat?rios mais expressos nestas amostras. Metodologia: As linhagens celulares de bexiga humanas RT4 e T24 foram obtidas a partir da ATCC. As c?lulas foram cultivadas em meio RPMI e DMEN, respectivamente, suplementado com 10 % de soro fetal bovino (SFB), sob condi??es ideais de cultivo. Para confirmar a relev?ncia dos receptores P2X (1-7) no tumor de bexiga, avaliou-se a express?o em bi?psias humanas. Para isso, ap?s aprova??o pelo comit? de ?tica local, amostras de tecidos normais e tumorais de bexiga foram obtidas dos mesmos pacientes, submetidos ? ressec??o cir?rgica no Hospital S?o Lucas / PUCRS. O RNA total dos tecidos foi isolado utilizando kit TRIzol . O n?vel de mRNA foi analisado utilizando an?lise RT - PCR . Resultados: O PCR em tempo real revelou que a express?o de mRNA de receptores purin?rgicos P2X, particularmente P2X4R foi significativamente up- regulada em ambas linhagens RT4 e T24. Dados a partir de bi?psias de tumores de bexiga humanos que comparam os resultados de express?o do tecido tumoral em rela??o ao tecido normal de bexiga, demonstrou que os receptores de P2X6 e P2X7 est?o superexpressos em tecidos tumorais. Doze genes relacionados com a inflama??o, CCL2, CCR2, TNF-?, MAPK3, IL-1?, IL-6, ADORA1, CD200, CD4, CHRNA4, EDNRA e ITGB2 foram significativamente superexpressos em c?lulas T24 derivadas de tumor de grau III quando comparadas com as c?lulas RT4 derivadas de tumor de grau I. Nossos resultados indicam que os genes superexpressos de inflama??o podem desempenhar um papel importante na regula??o do tumor de bexiga urin?ria. Conclus?o: Podemos concluir que purinoreceptores P2X e os genes inflamat?rios s?o diferencialmente distribu?dos entre bexiga normal e tumoral, o que pode contribuir para as diferentes caracter?sticas destes diferentes tipos de tumores.", publisher = {Pontif?cia Universidade Cat?lica do Rio Grande do Sul}, scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Medicina e Ci?ncias da Sa?de}, note = {Faculdade de Medicina} }