@MASTERSTHESIS{ 2020:1636026378, title = {Efeito do extrato etanólico de Gochnatia polymorpha (LESS.) e suas frações em linhagem celular de hepatocarcinoma HepG2}, year = {2020}, url = "http://tede2.pucrs.br/tede2/handle/tede/10009", abstract = "Gochnatia polymorpha (Less) (Asteraceae) é uma planta conhecida popularmente como Cambará e seus extratos vêm sendo apontados como alternativa terapêutica em diversas enfermidades, entre elas, as doenças inflamatórias. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito terapêutico do extrato etanólico de Gochnatia polymorpha (Less.) e de suas frações (FI – Diclorometano 90% e Metanol 10%, FII – Metanol 100% e FIII – Metanol 80%) em linhagem celular de hepatocarcinoma (HepG2). A proliferação celular foi avaliada pelo método de contagem por exclusão de azul de Trypan e pelo ensaio clonogênico. A toxicidade celular foi avaliada pela liberação da enzima lactato desidrogenase (LDH) pelas células. A análise de senescência celular foi realizada pela técnica de avaliação morfológica nuclear (NMA). Foi utilizada também citometria de fluxo para verificar os mecanismos relacionados à morte celular. O dano oxidativo foi avaliado pelo reagente sensível à oxidação DCFH-DA. O extrato etanólico e suas frações foram caracterizadas quanto à sua composição fenólica, por HPLC. Os resultados desse estudo mostraram que o extrato etanólico e suas frações diminuem a proliferação celular sem causar necrose, bem como diminuem a sobrevida das células restantes após o tratamento. A análise por citometria de fluxo não revelou morte celular por apoptose ou necrose. Entretanto, o extrato etanólico e suas frações provocaram um aumento da senescência celular, ativado pela via do gene p16, ocasionando a inibição da expressão dos genes CCDN1 e CDK4. Além disso, foi demonstrado aumento da autofagia, exceto pela fração FI. A senescência celular foi desencadeada pela produção de radicais livres. Os compostos fenólicos identificados no extrato e frações foram os ácidos hidroxibenzoico, cumárico, clorogênico e gálico, variando em proporção de acordo com o extrato. Concluimos que o extrato etanólico de G. polymorpha e suas frações tem efeito antiproliferativo em células HepG2 através da indução de autofagia e senescência proporcionadas pelo extresse oxidativo, podendo ter ter relação com a presença dos ácidos hidroxibenzoico e clorogênico, uma vez que ambos são relatados como indutores de ROS em neoplasias, sendo uma potencial alternativa para o tratamento do hepatocarcinoma.", publisher = {Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul}, scholl = {Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular}, note = {Escola de Ciências Saúde e da Vida} }