@PHDTHESIS{ 2021:879312897, title = {An?lise da morfologia de superf?cie e propriedades mec?nicas de c?lulas T24 de c?ncer de bexiga tratadas com quercetina}, year = {2021}, url = "http://tede2.pucrs.br/tede2/handle/tede/9794", abstract = "As an?lises via microscopia de for?a at?mica (do ingl?s: Atomic Force Microscopy - AFM) tornaram-se uma poderosa ferramenta para o estudo de c?lulas e tecidos. A possibilidade de extrair informa??es como elasticidade, rugosidade e morfologia de superf?cie em escala nanom?trica, de maneira n?o destrutiva, tem chamado a aten??o da comunidade cientifica. Em c?lulas de c?ncer, as informa??es mec?nicas s?o um importante par?metro indicador das fun??es b?sicas do tumor. As propriedades f?sicas de c?lulas cancerosas v?m sendo relacionadas ?s fun??es de ader?ncia, diferencia??o, invasividade e motilidade celular. Em nosso estudo analisamos a atividade antic?ncer da quercetina atrav?s da avalia??o das mudan?as morfol?gicas das c?lulas de c?ncer de bexiga (T24), al?m de realizarmos ensaios preliminares, com c?lulas T24 em suas condi??es nativas, para a cria??o de um protocolo de prepara??o de amostras, adequado ? obten??o de resultados mais fidedignos. Para isso, primeiramente, determinamos per?odos cr?ticos de cultura, e de espera p?s-fixa??o, tendo em vista reduzir vieses relacionados ao protocolo. As an?lises foram divididas em duas partes: 1? - Determinar o tempo de manuten??o em cultura celular no qual e poss?vel observar a degrada??o de c?lulas T24 por AFM (12h, 24h e 48h em cultura). 2? - Demonstrar o impacto do tempo de espera para an?lise no microsc?pio ap?s a fixa??o das c?lulas, em per?odos de 0h, 12h, 24 e 48h. Nossos resultados demonstram que, a partir de 48h de manuten??o em cultura celular, as c?lulas come?am a sofrer mudan?as morfol?gicas, diminui??o da elasticidade e aumento da rugosidade. Em rela??o ao tempo de espera p?s fixa??o, observamos t?nues diferen?as morfol?gicas a partir de 12h, contudo observa-se diminui??o significativa da elasticidade seguida de aumento de rugosidade. Em 24h e 48h as altera??es relacionadas a elasticidade e a rugosidade se mant?m, por?m observamos altera??es dr?sticas na morfologia de superf?cie, como o colapso de membrana plasm?tica. Assim, os dados relativos ? primeira parte do presente estudo demonstram a import?ncia do estabelecimento de per?odos cr?ticos de cultura e de espera p?sfixa??o, de modo a reduzir artefatos t?cnicos relacionados aos protocolos. Em um segundo momento e como objetivo principal do estudo, analisamos o efeito antic?ncer da quercetina sobre c?lulas T24, atrav?s do AFM, avaliando as propriedades mec?nicas e morfol?gicas das c?lulas. Nesse sentido, as c?lulas foram submetidas a doses de 40, 60 e 80 mM de quercetina, e analisadas por AFM 24 e 48 horas ap?s o tratamento. Observamos que conforme aument?vamos a dose de quercetina, as c?lulas se tornavam significativamente mais r?gidas e rugosas, indicando marcas biof?sicas da a??o antic?ncer da quercetina sobre as c?lulas T24. Esses dados demonstram, pela primeira vez, as altera??es mec?nicas e morfol?gicas dos efeitos antic?ncer da quercetina em c?lulas T24, analisadas por AFM.", publisher = {Pontif?cia Universidade Cat?lica do Rio Grande do Sul}, scholl = {Programa de P?s-Gradua??o em Biologia Celular e Molecular}, note = {Escola de Ci?ncias} }