Clonagem, expressão e purificação de antígeno recombinante no imunodiagnóstico da angiostrongilíase abdominal

Exportar este item:

Use este identificador para citar ou linkar para este item: https://tede2.pucrs.br/tede2/handle/tede/276

Registro completo de metadados

Campo DC	Valor	Idioma
dc.creator	Silva, Ana Cristina Arámburu da	-
dc.contributor.advisor1	Graeff-teixeira, Carlos	-
dc.date.accessioned	2015-04-14T13:09:47Z	-
dc.date.available	2007-08-24	-
dc.date.issued	2007-03-26	-
dc.identifier.citation	SILVA, Ana Cristina Arámburu da. Clonagem, expressão e purificação de antígeno recombinante no imunodiagnóstico da angiostrongilíase abdominal. 2007. 67 f. Tese (Doutorado em Zoologia) - Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul, Porto Alegre, 2007.	por
dc.identifier.uri	http://tede2.pucrs.br/tede2/handle/tede/276	-
dc.description.resumo	Angiostrongilíase abdominal é uma infecção zoonótica causada por Angiostrongylus costaricensis, um nematódeo com uma localização intra-vascular no mesentério. O diagnóstico é realizado somente com exame patológico de fragmentos do tecido ressecado, durante o tratamento cirúrgico de curso clínico complicado (perfuração intestinal e/ou obstrução). Métodos de imunodiagnóstico mostram muitas dificuldades com reação cruzada de anticorpos e a diversidade de resposta humoral. Esforços têm sido direcionados para uma contribuição na identificação e purificação de antígenos específicos de parasitos no desenvolvimento de métodos sorodiagnósticos. No presente estudo, foi analisado o uso de uma proteína recombinante de A. costaricensis, a proteína de choque térmico (HSP 20), em ELISA como sorodiagnóstico. Um dos clones de cDNA, obtido e expresso como uma pequena proteína de choque térmico HSP 20 com 147 aminoácidos, apresentou identidade com seqüências de pequenas proteínas de choque térmico de outros nematódeos. A seqüência correspondente foi sub-clonada no vetor de expressão pET-23a-d (+), utilizando a técnica de PCR para a construção da proteína recombinante HSP 20. O alto nível de expressão de HSP 20 em Escherichia coli BL 21 (DE3), clonado no vetor de expressão, foi observado após indução com 1 mM de IPTG a 37 ºC. A etapa da purificação do recombinante HSP 20 foi realizada com a resina de Ni-NTA. Análise do Western blot utilizando soro de um paciente com diagnóstico confirmado para angiostrongilíase abdominal, indicou que o produto de expressão purificado foi imunogênico. A sensibilidade da HSP 20 foi de 33%. Entretanto, 100% de especificidade da proteína recombinante sugere o uso de um painel de antígenos, na tentativa de múltiplos testes de varredura, para um sorodiagnóstico melhor e preciso da angiostrongilíase abdominal	por
dc.description.provenance	Made available in DSpace on 2015-04-14T13:09:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 389286.pdf: 1859740 bytes, checksum: 5056bcedea79433eb88e0c64523c9659 (MD5) Previous issue date: 2007-03-26	eng
dc.format	application/pdf	por
dc.thumbnail.url	http://tede2.pucrs.br:80/tede2/retrieve/6296/389286.pdf.jpg	*
dc.language	por	por
dc.publisher	Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul	por
dc.publisher.department	Faculdade de Biociências	por
dc.publisher.country	BR	por
dc.publisher.initials	PUCRS	por
dc.publisher.program	Programa de Pós-Graduação em Zoologia	por
dc.rights	Acesso Aberto	por
dc.subject	PARASITOS	por
dc.subject	NEMATÓDEOS	por
dc.subject	DOENÇAS PARASITÁRIAS	por
dc.subject	PROTEÍNAS DO CHOQUE TÉRMICO	por
dc.subject	DIAGNÓSTICO	por
dc.subject.cnpq	CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::ZOOLOGIA	por
dc.title	Clonagem, expressão e purificação de antígeno recombinante no imunodiagnóstico da angiostrongilíase abdominal	por
dc.type	Tese	por
Aparece nas coleções:	Programa de Pós-Graduação em Ecologia e Evolução da Biodiversidade

Arquivos associados a este item:

Arquivo	Descrição	Tamanho	Formato
389286.pdf	Texto Completo	1,82 MB	Adobe PDF	Baixar/Abrir Pré-Visualizar ×

Mostrar registro simples do item Recomendar este item Visualizar estatísticas

PUCRS

Biblioteca Digital de Teses e Dissertações